SPINeasyยฎ RNA Kit for Urine์ 5โ15 mL์ ์๋ณ ์๋ฃ์์ total RNA๋ฅผ ๋น ๋ฅด๊ณ ๊ฐํธํ๊ฒ ๋ถ๋ฆฌยท์ ์ ํ ์ ์์ต๋๋ค. ์ด ๊ณผ์ ์ ํน๋ณํ ์ฅ๋น๊ฐ ํ์ ์์ผ๋ฉฐ, ์ต์ํ์ ์กฐ์(minimal handling)์ผ๋ก ๋น ๋ฅด๊ณ ์ฌํ์ฑ ๋์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ ๊ณตํฉ๋๋ค.
๋ณธ ํคํธ๋ RNA MATRIX๋ฅผ ์ด์ฉํ ์คํ ์ปฌ๋ผ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ(spin column chromatography) ๋ฐฉ์์ ๊ธฐ๋ฐ์ผ๋ก ํฉ๋๋ค. RNA MATRIX๋ MP์ ๋ ์์ ์ธ ์ค๋ฆฌ์นด ๊ธฐ๋ฐ์ binding matrix๋ก, RNA ๊ฒฐํฉ ์ฉ๋์ ์ ์ฐ์ฑ์ ์ ๊ณตํ๋ฉฐ RNA๋ฅผ ์ ํ์ ์ผ๋ก ๊ฒฐํฉยท์ ์ ํฉ๋๋ค. ์ด ๊ณผ์ ์์ ํ๋์ด๋ ํด๋ก๋กํฌ๋ฆ์ ์ฌ์ฉํ์ง ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์, ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฑ์ ์ธํฌ ๊ตฌ์ฑ ์ฑ๋ถ์ผ๋ก๋ถํฐ RNA๋ฅผ ์์ ํ๊ฒ ๋ถ๋ฆฌํ ์ ์์ต๋๋ค.
์ ์ ๋ RNA๋ ๋์ ๋ฌด๊ฒฐ์ฑ(integrity)์ ์ ์งํ๋ฉฐ, Real-time PCR, RT-PCR, sequencing ๋ฑ ๋ค์ํ ํ์ ์คํ์ ๋ฐ๋ก ์ฌ์ฉ ๊ฐ๋ฅํฉ๋๋ค.

Figure 1. ์๋ก ๋ค๋ฅธ ์ธ๊ท ํจ๋์ ๊ฐ์ง ์ฌ๋์ ์๋ณ ์๋ฃ์์ RNA ์ถ์ถ ๊ฒฐ๊ณผ
(A) ๊ทนํ ๋ฎ์ ์ธ๊ท ํจ๋โ(B) ๋ฎ์ ์ธ๊ท ํจ๋โ(C) ์ค๊ฐ ์ธ๊ท ํจ๋โ(D) ๋์ ์ธ๊ท ํจ๋ โ ๊ฐ ์ธ๊ท ํจ๋ ๊ทธ๋ฃน ๋ด ๊ฐ์ธ ๊ฐ ํธ์ฐจ๋ ์์ผ๋, ์ ์ฒด์ ์ผ๋ก ์ธ๊ท ํจ๋์ด ์ฆ๊ฐํจ์ ๋ฐ๋ผ RNA ์์จ์ด ๋น๋ก์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ํ์ธํ์์ต๋๋ค.
Figure 2a

Figure 2b

Figure 2c

Figure 2d

Figure 2 (A-D). SPINeasyยฎ RNA Kit for Urine๊ณผ ํ์ฌ ์ ํ์ผ๋ก ์ถ์ถ๋ RNA์ RT-qPCR ๊ฒฐ๊ณผ ๋น๊ต
SPINeasyยฎ RNA Kit์ ์ด์ฉํด 12๊ฐ์ ์๋ณ ์๋ฃ์์ RNA๋ฅผ ์ถ์ถํ์๊ณ , ํ์ฌ Z(2A), N(2B), S(2C), M(2D) ์ ํ์ผ๋ก ๊ฐ๊ฐ 3๊ฐ์ ์๋ฃ๋ฅผ ๋ถ์ํ์์ต๋๋ค. 2 ฮผL์ RNA๋ฅผ template๋ก ํ์ฌ 16S rRNA(bacterial RNA) ๋ฐ GAPDH(human RNA) ํ๊น ํ๋ผ์ด๋จธ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ SYBR Green RT-qPCR์ ์ํํ์์ต๋๋ค.
โ SPINeasyยฎ RNA Kit for Urine์ ํ์ฌ ๋๋น Ct ๊ฐ์ด ๋ฎ๊ฒ ๋ํ๋, ๋์ผํ ๋ฐ์ ์กฐ๊ฑด์์ RNA ์์จ๊ณผ RT-qPCR ํจ์จ์ด ๋ชจ๋ ์ฐ์ํจ์ ํ์ธํ์์ต๋๋ค.
Application Notes
SPINeasyยฎ RNA Kit for Urine์ ์๋ณ ์๋ฃ๋ก๋ถํฐ RNA๋ฅผ ๋น ๋ฅด๊ณ ํจ์จ์ ์ผ๋ก ๋ถ๋ฆฌยท์ ์ ํ ์ ์๋๋ก ์ค๊ณ๋์์ต๋๋ค.
Usage Statement
Research Use Only (RUO)
Key Applications
Real time PCR, sequencing
| SKU | 116595050 |
| Application Notes | SPINeasyยฎ RNA Kit for Urine์ ์๋ณ ์๋ฃ๋ก๋ถํฐ RNA๋ฅผ ๋น ๋ฅด๊ณ ํจ์จ์ ์ผ๋ก ๋ถ๋ฆฌยท์ ์ ํ ์ ์๋๋ก ์ค๊ณ๋์์ต๋๋ค. |
| Base Catalog Number | 6595050 |
| Components | Equilibration Buffer R (12 mL), Lysis Buffer U (250 mL ร2), Binding Matrix (30 mL), Resuspension Buffer U (20 mL), Wash Buffer R (6 mL), RNase Free Water (5 mL), DNase I (55 ฮผL), DNase I Buffer (550 ฮผL), Column U (50 ea) |
| Pack Size | 50 Preps |
| Personal Protective Equipment | Safety Goggles/Faceshield; Gloves |
| Storage | Store at Room Temperature (15-25ยฐC), Dry environment. |
| Usage Statement | Research Use Only (RUO) |